2001-12-31-世界卫生组织-Recommendations_for_the_production_and_control_of_poliomyelitis_vaccine_oral_Addendum_2000_Annex_1_4页_392kb

总结：口服脊髓灰质炎疫苗生产与控制建议（附录2000）

核心内容

本文件是对1999年WHO关于口服脊髓灰质炎疫苗（OPV）生产与控制建议的修订，主要涉及神经毒力测试方法的更新。原建议中使用猴神经毒力测试作为标准，但考虑到伦理和实际操作问题，引入了TgPVR21转基因小鼠模型作为替代方法。该模型已被验证为适用于所有三种脊髓灰质炎病毒血清型的可靠替代方案。

主要观点

• TgPVR21小鼠模型：该模型已被证明是猴神经毒力测试的可行替代方案，特别是在脊髓灰质炎病毒类型1、2和3的神经毒力测试中。
• 实验室资格认证：实验室需通过标准实施流程，才能被认定为具备进行TgPVR21小鼠神经毒力测试的资格。此流程由WHO制定并详细说明。
• 测试流程标准化：测试需按照WHO提供的标准操作程序（SOP）进行，包括小鼠的来源、年龄、接种剂量、观察时间及数据记录等。
• 测试剂量标准：不同血清型的疫苗和参考病毒需使用特定的CCID50（细胞培养感染剂量50%）剂量进行测试，以确保测试结果的准确性。
• 数据记录与评估：测试结果需按标准表格记录，并提交给WHO进行评估，以监控全球范围内新测试方法的执行效果。
• 猴神经毒力测试仍为参考：尽管TgPVR21小鼠模型被推荐使用，但猴神经毒力测试仍作为最终参考方法，尤其在评估新病毒种子材料或新基质生产的疫苗时。

关键信息

1. TgPVR21小鼠模型要求

• 小鼠年龄应在6-8周之间。
• 小鼠应来自WHO标准操作程序中定义的来源。
• 小鼠需在运输后至少恢复7天再进行接种。
• 小鼠的饲养和管理应遵循WHO指南。

2. 测试小鼠数量

• 每个测试剂量需使用32只小鼠，分为疫苗组和参考病毒组。
• 两组小鼠性别应均衡分配。
• 若在同一测试中使用多个疫苗，应使用相同的参考病毒。
• 若测试分两天进行，每天应接种相同数量的小鼠。

3. 接种剂量标准

• 脊髓灰质炎病毒类型1：疫苗剂量为1.75 log₁₀ CCID50，参考病毒为2.75 log₁₀ CCID50，接种体积为5μl。
• 脊髓灰质炎病毒类型2：疫苗剂量为5.0 log₁₀ CCID50，参考病毒为6.0 log₁₀ CCID50，接种体积为5μl。
• 脊髓灰质炎病毒类型3：疫苗剂量为3.5 log₁₀ CCID50，参考病毒为4.5 log₁₀ CCID50，接种体积为5μl。
• 若使用其他参考病毒，剂量应根据参考病毒的致瘫比例确定。

4. 小鼠观察与处理

• 小鼠需在接种后每日观察2周，以检测瘫痪或麻痹现象。
• 确认瘫痪后，应人道地处理小鼠。
• 所有小鼠应在接种后第14天被处理。
• 需排除因外伤或非脊髓灰质炎原因导致的死亡或瘫痪小鼠。

5. 测试结果评估

• 测试结果应基于疫苗和参考病毒组中出现瘫痪或麻痹的小鼠数量进行比较。
• 需满足标准操作程序中规定的有效性标准。
• 统计接受标准也包含在SOP中，以确保结果的科学性和可重复性。

6. 参考文献

• 1. WHO专家委员会第五十次会议报告：《口服脊髓灰质炎疫苗的生产与控制建议》（2002年，技术报告系列第904号）。
• 2. WHO关于TgPVR21小鼠的维护与分发指南（1993年，世界卫生组织公报）。