2006-12-31-世界卫生组织-Recommendations_for_inactivated_rabies_vaccine_for_human_use_produced_in_cell_substrates_and_embryonated_eggs,_Annex_2,_TRS_No_941_50页_484kb

WHO 推荐：人用灭活狂犬病疫苗生产控制

Annex 2 | 2007

概述

本指南旨在规范人用灭活狂犬病疫苗（细胞培养或鸡胚生产）的生产、质量控制、非临床及临床评估标准，推动国际许可使用和质量保障。取代1981-1994所有旧版要求，涵盖细胞系、原代细胞和鸡胚培养等系统。

狂犬病与现状

• 全球死亡：50,000人/年，多发于贫困区域，儿童占半数受害者。
• 疫苗控制关键：免疫预防（暴露前/后）的核心，要求疫苗具安全性（神经组织疫苗已被淘汰）、效力和一致性。

生产及控制（Part A）

核心推荐

定义与术语

• 统一规范“狂犬病疫苗”，强调定义、国际标准（如效力单位IU）、生物学属性。

生产流程

• 细胞来源：Vero细胞、原代肾细胞、鸡胚纤维母细胞等，按WHO规范进行认证（清洁动物、细胞银行制备）。
• 病毒种子：疫苗株需生物学稳定，进行杀菌、灭活等规范测试。
• 无菌操作：禁止使用Beta-内酰胺类抗生素，全程设定生物安全等级（BSL）。
• 病毒灭活：常用β-丙内酯（需验证有效性且污染物可清除）或甲醛，灭活后需检测残余活病毒。

质量控制

• 单次收获检测、终产品效力测试（NIH法测效价，≥2.5 IU/剂量）
• 质控项目：病毒滴定、抗原含量、残余DNA、蛋白质、内毒素监测。

非临床评估（Part B）

• 疫苗进入人体前需在动物模型验证：
  • 安全性测试（如致死性）
  • 免疫原性测试
• 推荐测试：幼鼠体内保护实验、细胞敏感性放大检测。

临床评估（Part C）

• 必须在狂犬病模型中确定：
  • 免疫剂量、接种程序和剂型适应性
  • 中和抗体水平（＞0.5 IU/mL）、抗体持续时间
  • 采用标准化读取（如RFFIT或FAVN）
• 临床开发阶段：需同步考虑暴露前/后应用模式。

四、国家监管要求（Part D）

• 一致性生产：建议国家监管机构基于国际标准完善自己的验收标准（如建立工作参考品、有效期定义）
• 数据摘要：评审生产过程、检测结果一致性数据后签署上市批准。

总结要点

• 核心目标：安全、高效与可控狂犬病疫苗。
• 技术重点：明确细胞培养/鸡胚生产、病毒灭活、检测方法与质量参数。
• 监管导向：要求与国际标准无缝衔接。
• 未来展望：促进一致性检测、采纳体外抗原测试、持续观察稳定性与副作用特征。